در حال حاضر، واقعی جهانیپودر بروملینتولید کنندگان عمدتا در تایلند و اندونزی مستقر هستند. Chongqing Joywin Natural Products Co., Ltd. یکی از تولیدکنندگان اصلی با تأسیسات آنزیم خام است که در Prachuapkhirikhan تایلند نیز واقع شده است. در سال های اخیر، به دلیل افزایش تقاضا در بازار بروملین، کمبود عرضه وجود داشته است. و مقدار زیادی "بروملین" هندی با قیمت بسیار پایین وارد بازار جهانی شد. قیمت 20 تا 60 دلار آمریکا به ازای هر کیلوگرم 2400GDU "Bromelain" است.
پس از بررسی، مشخص شد که هیچ کارخانه تولید بروملین در هند وجود ندارد. در ابتدا، روش آزمایش فعالیت «بروملین» هند عمدتاً بر اساس استاندارد سازمانی بود و این شرکتهای هندی در روش آزمایش با ضریب تبدیل تنظیم شده در فرمول برای دستیابی به تشخیص فعالیت آنزیم واجد شرایط تقلب کردند.
|
تایپ کنید |
آزمایش سازنده هند "بروملین". |
سنجش مشترک بین المللی |
یادداشت |
|
|
سنجش از |
آزمایش GDU سازنده هندی |
سنجش بین المللی مشترک GDU |
||
|
شباهت ها |
لایه |
ژلاتین |
ژلاتین |
از همان بستر استفاده کنید |
|
تعریف فعالیت آنزیم |
تعریف واحد (واحد هضم ژلاتین-GDU): یک واحد 1.{2}} میلی گرم آمینو نیتروژن از ژلاتین را در 20 دقیقه در pH 4.5 در 45 درجه هیدرولیز می کند. |
تعریف واحد (واحد هضم ژلاتین-GDU): یک واحد 1.{2}} میلی گرم آمینو نیتروژن از ژلاتین را در 20 دقیقه در pH 4.5 در 45 درجه هیدرولیز می کند. |
تعریف فعالیت آنزیم GDU یکسان است |
|
|
مراحل تست |
از محلول NaOH برای آزمایش تیترانت استفاده کنید |
از محلول NaOH برای آزمایش تیترانت استفاده کنید |
روش تست اصلی یکسان است |
|
|
تفاوت |
غلظت تیترانت |
0.05mol/L تیترانت NaOH |
0.1mol/L تیترانت NaOH |
غلظت محلول تیترانت NaOH در روش رایج GDU دو برابر از روش GDU هند است. |
|
نقطه پایان تیتر |
نقطه پایان PH 7.8 |
نقطه پایان PH 9.0 |
مقدار pH مختلف در شناسایی نقطه پایانی |
|
|
فرمول |
|
|
فرمول محاسباتی مختلف |
|
|
سنجش هندی: هیچ توضیحی برای فرمول محاسباتی وجود ندارد بر اساس روش آزمایش و تعریف فعالیت آنزیم، فرض می کنیم: T{0}} تیتر آزمایش (ml 0.05 N NaOH) B{0}} تیتر خالی (ml 0.05 N NaOH) میلی لیتر 0.1- وزن اولیه آنزیم (گرم) |
T{0}} تیتر آزمایش (ml 0.1 N NaOH) میلی لیتر B{0}} تیتر خالی (ml 0.1 N NaOH) میلی لیتر N=طبیعی بودن NaOH استاندارد (mol/L) M=وزن اولیه آنزیم (گرم) 14-وزن مولکولی نیتروژن؛ 50-نسبت رقت نمونه آنزیمی |
بر اساس سنجش سازنده هندی، و همراه با تعریف رایج بین المللی فعالیت آنزیم GDU، رقم 700 در فرمول باید (14×0.05×100=70) باشد، اما آنها آن را به عنوان 700 علامت گذاری می کنند. منجر به یک نتیجه اشتباه می شود که 10 برابر افزایش می یابد. |
با توجه به اینکه مشتریان بیشتر و بیشتر متوجه شدند که این یک سنجش اشتباه است و متوجه شدند که فعالیت واقعی تنها یک دهم فعالیت واقعی است، تولیدکنندگان هندی شروع به ترکیب پاپائین با آنزیم های دیگر به عنوان بروملین کردند. از آنجایی که روش تشخیص کمی GDU برای پاپائین و بروملین یکسان است، "بروملین" هندی موجود در بازار دارای فعالیت آنزیمی است. با این حال از آنجایی که پاپائین تولید شده در هند بوی بد تخمیر پروتئین دارد، معمولا از طعم دهنده ها و عطرها برای پوشاندن بو استفاده می کنند. این باعث می شود که "بروملین" هندی با بوی تخمیر و بوی عطر و طعم. در حالی که بروملین خالص واقعی بوی معطر خاصی از ساقه آناناس دارد.
شناسایی بروملین
1. تجزیه و تحلیل SDS-PAGE
علامت: نشانگر M-protein,1-Bromelain(Joywin)(10μL); 2-Bromelain (تولید کننده هند) (10μL); 3-بروملین (هند) (10μL); 4-پاپائین (10 میکرولیتر)
وزن مولکولی نوارهای نشانگر پروتئین از بالا به پایین به ترتیب زیر است:
180 کیلو دالتون، 130 کیلو دالتون، 100 کیلو دالتون، 70 کیلو دالتون، 55 کیلو دالتون، 40 کیلو دالتون، 35 کیلو دالتون، 25 کیلو دالتون، 15 کیلو دالتون، و 10 کیلو دالتون.
نتایج تجزیه و تحلیل SDS-PAGE نشان می دهد که باند مشخصه بروملین در حدود 25 کیلو دالتون است، 3 باند مشخصه اصلی بروملین وجود دارد، در حالی که پاپائین دارای باندهای متعدد از 13 تا 30 است.
2. شناسایی MALDI-TOF MS
از کروماتوگرام MALDI-TOF MS می توان دید، بروملین تنها دارای یک پیک مشخصه است، در حدود 24.5 کیلو دالتون، در حالی که پاپائین دارای سه پیک مشخصه است، در حدود 13.4 کیلو دالتون، 23.7 کیلو دالتون و 26.7 کیلو دالتون. همچنین نشان می دهد که جوهر "بروملین" هندی پاپائین است.
جویوینیک شرکت بیوتکنولوژی نوآورانه که در سال 2013 تأسیس شد. کارخانه JOYWIN Bromelain واقع در تایلند از منابع فراوان محلی برای ارائه مشخصات مختلف محصولات بروملین به مشتریان استفاده می کند. از 200GDU/g تا 2400GDU/g. برگزاری کارگاه های بروملین، کارگاه های پروتئاز گیاهی و انبارها نیز دارای امکانات پیشرفته و سیستم های کنترل کیفیت دقیق هستند. ما به عنوان یکی از چهار تولید کننده جهانی بروملین، FSSC22000، ISO9001، ISO14001، ISO22000، BRC و کارخانه دارای گواهینامه Cgmp هستیم. اگر می خواهید بیشتر بدانیدپودر بروملینیا علاقه مند به خرید آن هستید، می توانید از طریق ایمیلcontact@joywinworld.com. پس از مشاهده پیام در اسرع وقت به شما پاسخ خواهیم داد.